Подсчет цитоза в ликворе

Содержание
  1. Макро- и микроскопическое исследование ликвора
  2. Определение физических свойств ликвора
  3. Подсчет клеточных элементов
  4. Цитологическое исследование
  5. Всё о ликворе при менингите: что это, как проводится исследование и другие нюансы заболевания
  6. Методы диагностики менингита
  7. Что это за жидкость?
  8. Как проводится исследование?
  9. Нормальные показатели у здорового человека
  10. Таблица соотношения формы заболевания и цвета жидкости
  11. Состав текучей субстанции
  12. Серозный
  13. Гнойный
  14. Расшифровка показателей
  15. Число клеток и цитоза
  16. Белок
  17. Глюкоза
  18. Ферменты
  19. Хлориды
  20. Заключение
  21. Персональный сайт – Ликвор
  22. Методы извлечения ликвора
  23. Цистернальный ликвор – 0-2 в камере
  24. Химическое исследование ликвора
  25. Унифицированный метод определения глобулинов
  26. Состав ликвора при менингитах: расшифровка результата анализа, показатели, цитоз
  27. Зачем проводить анализ цереброспинальной жидкости
  28. Что представляет собой анализ
  29. Этапы исследования
  30. Макроскопическое исследование
  31. Цвет
  32. Прозрачность
  33. Фибринозная пленка
  34. Микроскопическое исследование
  35. Бактериоскопический и бактериологический
  36. Расшифровка показателей ликвора

Макро- и микроскопическое исследование ликвора

Подсчет цитоза в ликворе

Для проведения данных исследований необходимо следующее оснащение рабочего места:

  1. Смесители для лейкоцитов.
  2. Пастеровские пипетки.
  3. Камеры Фукса-Розенталя и камеры Горяева со стеклами к ним.
  4. Шпатели и иглы.
  5. Центрифуга.
  6. Предметные и покровные стекла.
  7. Микроскоп.
  8. Метилвиолет (генцианвиолет).
  9. Фуксин.
  10. Фенол.
  11. Концентрированная уксусная кислота.
  12. Дистиллированная вода.
  13. Фиксатор Май-Грюнвальда.
  14. Краска Романовского.
  15. Азур II.
  16. Эозин.
  17. Эозин желтый.
  18. Двузамещенный фосфорнокислый натрий.
  19. Однозамещенный фосфорнокислый калий.

Рис. 62. Сетка камеры Фукса-Розенталя.

Определение физических свойств ликвора

Количество ликвора устанавливают на глаз в пробирках, в которых он был доставлен в лабораторию.
Цвет и прозрачность ликвора определяют путем сравнения с дистиллированной водой (для этого ликвор и дистиллированную воду наливают в две пробирки одинакового диаметра).

Отмечают макроскопические примеси (фибринозные пленки, кровяные сгустки и др.).

Подсчет клеточных элементов

Количество клеток в лик воре (цитоз) подсчитывают тотчас после получения жидкости, для чего используют камеру Фукса-Розенталя или Горяева. В смеситель для лейкоцитов набирают до метки 1,0 раствор Самсона: 30 мл ледяной уксусной кислоты, 2 мл карболовой кислоты (насыщенный раствор фенола), 2 мл спиртового раствора фуксина 1 : 100, дистиллированной воды до 100 мл.

После взятия реактива кончик смесителя вытирают и его кладут на стол в горизонтальном положении. Ликвор в пробирке перемешивают в течение 2-3 минут, вращая пробирку между ладонями, после чего набирают в смеситель с краской до метки 11. Для окрашивания клеточных элементов смеситель оставляют на 2-3 минуты и подготавливают камеру Фукса-Розенталя (рис.

62) пли Горяева. Затем смеситель встряхивают, 2-3 капли жидкости выпускают на фильтровальную бумагу и последующей каплей заполняют камеру. Подсчет форменных элементов производят при опущенном конденсоре микроскопа (окуляр 7Х, объектив 40Х). Клеточные элементы сосчитывают на всей площади сетки камер. Рекомендуется сосчитать две камеры и вывести среднее.

[attention type=yellow]

При использовании камеры Фукса-Розенталя (см. рис. 62) (площадь сетки 16 мм2, глубина 0,2 мм, объем 3,2 м , разведение 11: 10) число элементов в 1 мм3 выражают формулой:

[/attention]

Число элементов в 1 мм3 = число элементов на площади сетки х 11/32.

При получении ликвора в небольшом количестве пастеровской пипеткой отмеривают 10 капель исследуемой жидкости и каплю краски, смешивают их на часовом стекле, а затем заполняют камеру.

При значительном содержании клеток – плеоцитозе (более 200 на площади сетки) сосчитывают половины сетки камеры Фукса-Розенталя, полученный результат удваивают и рассчитывают как обычно.

При плеоцитозе более 1000 подсчитывают первый ряд больших квадратов сетки и полученный результат умножают на 4 и т.д.

В норме имеется от 1 до 3 экземпляров лимфоцитов в 1 мм3.

Цитологическое исследование

Цитологическое исследование сводится к распознаванию клеточных элементов ликвора, что лучше всего достигается в окрашенных препаратах.

Техника окраски препаратов. Препараты для микроскопического исследования готовят из клочков, фибринозных свертков и из отцентрифугированного осадка. Вначале изучают нативные препараты.

Для этого препарат накрывают покровным стеклом и изучают под микроскопом при большом увеличении следующим образом: снимают покровное стекло, материал равномерно распределяют по поверхности предметного стекла; мазок высушивают, фиксируют и окрашивают по Романовскому.

Так как элементы ликвора легко окрашиваются, готовят более слабое разведение краски Романовского — 1-2 капли на 5 мл воды — и красят 15-20 минут. Морфологические особенности клеточных элементов хорошо выявляются при окраске их по методу С. Б. Ро- зиной.

Доставленный ликвор центрифугируют 5 минут при 3000 об/мин. Отцентрифугированную жидкость переливают в пробирку для химических исследований.

Оставшийся в центрифужной пробирке осадок встряхивают и переносят каплю его на обезжиренное предметное стекло. Слегка покачивая стекло, капле дают равномерно распределиться на поверхности последнего.

Таким образом, для приготовления мазка не используют шлифованное стекло во избежание малейшей травмы и деформации клеток.

Если цитоз небольшой (менее 50 клеток в 3 мм3), весь осадок распределяют на небольшом участке стекла, приблизительно 1 см2. При цитозе, превышающем 100 клеток в 3 мм3, осадок равномерно распределяют по предметному стеклу на участке 1,5-2 см2.

При цитозе более 500 клеток в 3 мм3 осадок распределяют по предметному стеклу на площади 2-3 см2 и через 1-2 минуты сливают. За это время форменные элементы оседают на стекле и образуют равномерный тонкий слой.

При обилии клеточных элементов — 1000 и более в 3 мм3 — или при наличии крови в спинномозговой жидкости осадок распределяют по всей поверхности предметного стекла и тотчас же сливают.

После этого стекло на 5-10 минут устанавливают почти вертикально, чем достигается минимальная толщина мазка. Далее препарат высушивают 10-15 минут при температуре 40-50° и фиксируют метиловым спиртом: 2-3 капли метилового спирта наливают на мазок и оставляют на стекле до полного высыхания (приблизительно 3-5 минут).

[attention type=red]

Приготовление препарата, его высушивание и фиксацию удобно проводить в сушильном шкафу. Предварительно пронумерованные стекла раскладывают рядами в сушильном шкафу и осадки из центрифужных пробирок наливают на стекло с соответствующим номером. Препараты с очень большим цитозом размещают в сушильном шкафу отдельно, готовя из них мазок, как описано выше.

[/attention]

После фиксации препараты окрашивают.
Реактивы, необходимые для окраски:

  1. Азур II — 1 г азура растворяют в 1 л дистиллированной воды.
  2. Эозин желтый — 1 г эозина растворяют в 1 л дистиллированной воды.
  3. Буферная смесь с рН 7,0.

Буферную смесь готовят следующим образом: 3,2 г двуосновного фосфорнокислого натрия (Na2HP04) и 1,63 г одноосновного фосфорнокислого калия (КН2РО4) растворяют в 1 л дистиллированной воды.

Буферную смесь следует хранить на холоду (при температуре 4°) или консервировать добавлением нескольких кристаллов тимола.

Перед окраской смешивают 3 мл раствора азура II и 2 мл раствора желтого эозина в 25 мл раствора буферной смеси.

Приготовленные из осадка ликвора и фиксированные препараты заливают краской на 6-12 минут. Препараты, приготовленные из ликвора с небольшим цитозом, следует красить 6-7 минут, а с цитозом выше 1000 клеток в
3 мм3 или с примесью крови — 10-12 минут. После окраски препараты смывают дистиллированной водой, устанавливают в штатив и высушивают в сушильном шкафу.

В окрашенных препаратах неизмененные форменные элементы спинномозговой жидкости имеют такой же вид, как в мазках крови, окрашенных по способу Романовского, т. е.

ядра клеток фиолетового цвета, цитоплазма нейтрофилов розоватая, лимфоцитов и полибластов голубая, зернистость эозинофилов оранжево-красная.

Если ядра клеток имеют голубоватый оттенок, то продолжительность окраски препарата следует увеличить на 1-2 минуты.

[attention type=green]

В таких мазках возможен подсчет клеточных элементов в процентах (морфологию лейкоцитов и технику подсчета их в мазке).

[/attention]

В окрашенных препаратах из ликвора обнаруживают нейтрофилы, эозинофилы, лимфоциты, моноциты, плазматические клетки, по морфологическим признакам идентичные соответствующим клеткам крови, а также полибласты, зернистые шары, клетки арахноидэндотелия и новообразований (рис. 63).

Рис. 63. Клетки нормального ликвора.

Вид в камере: 1 – микрофаг, 2 – макрофаг перстневидный, 3 – моноцит, 4 – зернистые шары, 5 – нейтрофилы, 6 – лимфоциты, 7 – плазмоциты, 8 – эритроциты, 9 – клетки эпендимы.

В окрашенном препарате: 1 – макрофаг, 2 – полибласт, 3 – лимфоидный полибласт, 4 – зернистый шар, 5 – нейтрофилы, 6 – лифоциты, 7 – плазмоциты, 8 – эритроциты, 9 – клетки эпендимы, 10 – эозинофилы.

Источник: http://ginekolog.my1.ru/publ/klinicheskie_issledovanija/spinnomozgovaya_zhidkost/makro_i_mikroskopicheskoe_issledovanie_likvora/41-1-0-773

Всё о ликворе при менингите: что это, как проводится исследование и другие нюансы заболевания

Подсчет цитоза в ликворе

Менингитом называют воспаление мозговых оболочек инфекционного характера с появлением менингеальных и общемозговых проявлений. Анализ спинномозговой жидкости считается единственным достоверным способом точного и быстрого диагностирования менингита. Благодаря методу можно установить возбудителя инфекции, отличить гнойную форму от серозной, а также контролировать эффективность терапии.

Методы диагностики менингита

Диагностическое исследование включает в себя такие процедуры:

  1. Клинический и биохимический анализ крови.
  2. Анализ ликвора.
  3. ПЦР.
  4. МРТ.
  5. КТ.
  6. ЭЭГ (электроэнцефалография).
  7. ЭМГ (электромиография).

Что это за жидкость?

Ликвором называют жидкость, постоянно циркулирующую в элементах головного и спинного мозга. В норме она выглядит как бесцветная прозрачная текучая субстанция, заполняющая желудочки головного мозга, подпаутинное и субдуральное пространства.

Спинномозговая жидкость продуцируется в желудочках ГМ сосудистой оболочкой, покрывающей эти полости. Ликвор содержит различные химические вещества:

  • витамины;
  • органические и неорганические соединения;
  • гормоны.

Кроме того, в ликворе имеются вещества, которые перерабатывают поступающую кровь с ее разложением на полезные питательные элементы. Вместе с этим происходит производство достаточного содержания гормонов, которые влияют на эндокринную, половую и иные системы организма.

Справка! Основной функцией спинномозговой жидкости считается амортизация: благодаря ей создаются условия, чтобы смягчить физическое воздействие при совершении человеком основных движений, что уберегает мозг от критических повреждений во время сильного удара.

Как проводится исследование?

Процедура, совершаемая для забора ликвора, называется люмбальной пункцией. Для ее осуществления пациент принимает положение лежа либо сидя. Если исследуемый сидит, он должен находиться ровно, с согнутой спиной, чтобы позвонки располагались в одной вертикальной линии.

В случае когда больной лежит, он поворачивается набок, согнув колени и подтянув их к груди. Место укола выбирают на уровне позвоночного столба, где нет риска повредить спинной мозг.

Люмбальная пункция – это процедура, которую проводить может только квалифицированный врач! Доктор обрабатывает спину исследуемого спиртом и йодсодержащим раствором, после чего нащупывает по межпозвонковым промежуткам место пункции: у взрослых на уровне II и III поясничных позвонков, а у детей – между IV и V.

Специалист вводит туда анестетик, после чего выжидают 2-3 минуты для обеспечения обезболивания тканей.

Далее иглой Бира с мандреном врач осуществляет пункцию, двигаясь между остистыми отростками и проходя связки.

Признаком попадания иглы в подпаутинное пространство является ощущение провала.

Если после этого извлечь мандрен, при правильном выполнении процедуры будет выделяться жидкость.

Небольшое количество берут для проведения исследования.

Нормальные показатели у здорового человека

При отсутствии патологии спинномозговая жидкость имеет следующий состав:

  1. Плотность: 1003-1008.
  2. Клеточные элементы (цитоз): до 5 в 1 мкл.
  3. Уровень глюкозы: 2,8-3,9 ммоль/л.
  4. солей хлора: 120-130 ммоль/л.
  5. Белок: 0,2-0,45 гр/л.
  6. Давление: в положении сидя – 150-200 мм. вод. ст., а лежа – 100-150 мм. вод. ст.

Внимание! Нормальный ликвор должен быть прозрачным, бесцветным и не содержать никаких примесей.

Таблица соотношения формы заболевания и цвета жидкости

Серозный, вирусныйТуберку-лезныйСифили-тическийГнойный
ЦветПрозрачныйПрозрачный, опалесцируетПрозрачный, редко мутныйМутный
Клетки в 1 мкл20-800200-700100-20001000-5000
Белок (г/л)До 1,51-5Умеренно повышен0,7-16
Глюкоза (ммоль/л)Не измененаРезко сниженаНе измененаРезко снижена
Хлориды (ммоль/л)Не измененыСниженаНе измененыСнижены или не изменены
Давление (мм. вод. ст.)ПовышеноПовышеноНезначительное повышениеПовышено
Фибриновая пленкаВ большинстве случаев отсутствуетВ 40% случаев присутствуетОтсутствуетГрубая или в виде осадка

Состав текучей субстанции

В зависимости от возбудителя инфекции спинномозговая жидкость может иметь разный состав. Давайте подробно рассмотрим ликвор 2 форм воспаления.

Серозный

Характеристики ликвора:

  • Цвет – бесцветный, прозрачный.
  • Цитоз: обнаруживается лимфоцитарный плеоцитоз. Уровень клеточных элементов – от 20 до 800 в 1 мкл.
  • Значения белка: повышенные, до 1,5 гр/л (белково-клеточная диссоциация).
  • Уровень глюкозы и хлоридов не изменен.

Гнойный

Характеристика спинномозговой жидкости при патологии:

  • Цвет – различный в зависимости от возбудителя менингита. К примеру, при менингококке он будет мутным, желтым, при пневмококке – белесоватым и голубоватым в случае сине-гнойной палочки.
  • Цитоз: огромное число клеток (клеточно-белковая диссоциация), достигающее 1000-5000 клеточных элементов на 1 мкл. Характерен нейтрофильный плеоцитоз.
  • белка: повышенное, в пределах 0,7-16,0 г/л.
  • Уровень глюкозы снижен, около 0,84 ммоль/л.
  • Количество хлоридов снижено либо не изменено.
  • Наличие фибриновой пленки в ликворе либо осадка.

Расшифровка показателей

На основании значений данных спинномозговой жидкости специалисты уточняют диагноз и в соответствии с этим могут назначить адекватную терапию.

Число клеток и цитоза

Производится подсчет клеток в спинномозговой жидкости с последующим определением их преобладающего вида. Повышенное содержание (плеоцитоз) говорит о наличии воспалительного процесса. Более выраженным плеоцитоз бывает при бактериальном менингите, в частности туберкулезном воспалении мозговых оболочек.

При иных заболеваниях (эпилепсия, гидроцефалия, дегенеративные изменения, арахноидит) цитоз нормальный. Специалисты производят подсчет клеточных элементов, которые представлены в большинстве случаев лимфоцитами или нейтрофилами.

Изучив цитограмму, врач может сделать вывод о характере патологии. Так, лимфоцитарный плеоцитоз говорит о серозном менингите или туберкулезном менингите с хроническим течением. Нейтрофильный лейкоцитоз – наблюдается при острой инфекции (бактериальный менингит).

Важно! Во время анализа ликвора необходимо оценить диссоциацию – соотношение клеточных элементов с содержанием белка. Клеточно-белковая диссоциация характерна для менингитов, а белково-клеточная – для серозного воспаления мозговых оболочек, а также застойных явлений в ликворных путях (новообразование, арахноидит).

Белок

Анализ содержания белка в СМЖ позволяет уточнить характер заболевания, а также оценить состояние гемато-энцефалического барьера. В норме его уровень находится в пределах 0,2-0,45. Повышение белка в ликворе характерно для менингита, кровоизлияний в мозг.

Глюкоза

Значения глюкозы должны составлять 2,8-3,9 ммоль/л. Однако даже у здоровых людей могут быть небольшие колебания содержания вещества. Для правильной оценки глюкозы в спинномозговой жидкости желательно определять ее и в крови: при отсутствии патологии она будет превышать в 2 раза значения в ликворе.

Повышенный уровень отмечается при сахарном диабете, нарушениях мозгового кровообращения, остром энцефалите. Сниженный уровень глюкозы бывает при менингите, новообразованиях, субарахноидальном кровоизлиянии.

Ферменты

Ликвор характеризуется низкой активностью содержащихся в нем ферментов. Изменение активности ферментов в ликворе при различных заболеваниях носят в основном неспецифический характер. При туберкулезном и гнойном менингите повышается содержание АлАТ и АсАТ, ЛДГ – бактериальном воспалении мозговых оболочек, а повышение общей холинэстеразы – об остром течении менингита.

Хлориды

В норме содержание солей хлора в СМЖ составляет 120-130 ммоль/л. Снижение их уровня может говорить о менингите различной этиологии и энцефалитах. Повышение отмечается при болезнях сердца, почек, дистрофических процессах и образованиях в головном мозге.

Заключение

Процедура забора спинномозговой жидкости обязательно должна осуществляться квалифицированным опытным специалистом, а пациенту необходимо в точности выполнять все его указания. Исследование ликвора позволяет доктору уточнить диагноз и на основании этих данных подобрать правильное лечение.

Если вы хотите проконсультироваться со специалистами сайта или задать свой вопрос, то вы можете сделать это совершенно бесплатно

Источник: https://inBrain.top/bolezni/meningit/vidy/likvor.html

Персональный сайт – Ликвор

Подсчет цитоза в ликворе

ИССЛЕДОВАНИЕ СПИННОМОЗГОВОЙ ЖИДКОСТИ (ЛИКВОРА)

Физиология ликворообразования.

Головной и спинной мозг хорошо защищены плотным костным покровом – черепной коробкой и позвоночником.

К внутренней поверхности костей черепа прилегает плотная фиброзная твёрдая мозговая оболочка, под которой находится паутинная оболочка, покрывающая в виде очень тонкого прозрачного бесструктурного листка, головной мозг. Книзу эта оболочка переходит в паутинную оболочку спинного мозга.

Вся поверхность мозга окутана разветвлённой сетью сосудов, заключённых в мягкую мозговую оболочку, покрывающую ткань мозга в глубине борозд, щелей и ямок. Паутинная оболочка переходит с одной возвышенности на другую, образуя различной величины подпаутинные вместилища.

Наиболее крупные из них получили название цистерн.

Между паутинной и мягкой оболочкой и находится так называемое подпаутинное (субарахноидальное) пространство. Оно заполнено ликвором и является единым для головного и спинного мозга.

Спинномозговая жидкость (цереброспинальная жидкость, ликвор) циркулирует между оболочками мозга, в его желудочках, цистернах и в спинномозговом канале.

Ликвор образуется в желудочках мозга из плазмы крови благодаря процессам фильтрации, секреции и осмоса. Из желудочков ликвор поступает в цистерны мозга и в субарахноидальное пространство. Затем через кровеносные капилляры всасывается в венозную и частично лимфатическую систему.

За сутки образуется от 400 до 600 мл ликвора. Циркуляция её происходит непрерывно; в субарахноидальных пространствах содержится одновременно 100-150 мл ликвора.

Функции ликвора

Ликвор – это своеобразная биологическая жидкость, необходимая для функционирования мозга и выполняющая защитную функцию.

Ликвор является средой для обмена веществ между мозгом и кровью, носителем питательных веществ от кровеносных сосудов к нервным клеткам, это место выделения продуктов жизнедеятельности мозговой ткани. Мозг не имеет лимфатической системы, и продукты метаболизма удаляются через капиллярный кровоток.

Ликвор можно рассматривать как растворитель некоторых веществ, которые транспортируются от одного участка мозга к другому, например: из гипоталамуса к гипофизу.

Ликвор необходим для регуляции дыхательной активности и кровообращения. Например: изменение концентрации Ca, K, Mg и других микроэлементов в ликворе приводит к нарушению дыхания, кровяного давления, изменяется частота сердечных сокращений и др.

Физиологическое значение ликвора:

– механическая защита мозга от ударов и сотрясений о кости черепа,

– доставка питательных веществ нервным клеткам,

– экскреция, т.е. выделение некоторых метаболитов мозга,

– служит транспортным средством для гормонов и других веществ,

– поддерживает постоянство окружающей среды мозга (гомеостаз),

– осуществляет функцию специфического иммунобиологического барьера.

Таким образом, ликвор выполняет важную роль в процессах жизнедеятельности мозговой ткани.

Методы извлечения ликвора

Для исследования ликвор получают путём прокола – пункции. Пункцию всегда производит врач в условиях операционной, специальной иглой, которая вводится в подпаутинное пространство.

Прокол делают в строго определённых местах:

1. Между III и IV поясничными позвонками – поясничная (люмбальная) пункция.

2. Между затылочной костью и II шейным позвонком, в большую цистерну мозга – подзатылочная (субокципитальная) или цистерная пункция.

[attention type=yellow]

3. В месте сочленения височной, лобной и теменной костей – желудочковая (вентрикулярная) пункция.

[/attention]

Из иглы ликвор вытекает свободно. Её собирают в 2 пробирки, хотя общее количество её чаще всего невелико (не более 10 мл). С полученным материалом следует обращаться очень бережно, так как пункция довольно тяжёлая манипуляция для больного. После прокола он должен находиться на строго постельном режиме в течение 2-3 дней.

Так как ликвор обладает выраженными цитолитическими свойствами, он должен быть доставлен в лабораторию и исследован немедленно после его взятия. При продолжительном его хранении при комнатной температуре происходит разрушение форменных элементов.

При охлаждении менингококки и другие возбудители инфекционных заболеваний могут погибнуть.

В лаборатории тотчас делают посев на питательные среды и производят бактериоскопические, биохимические и серологические исследования, определяют также физические свойства, цитоз, изучают морфологию клеток.

Исследование состава и свойств ликвора имеет диагностическое значение при заболеваниях ЦНС и мозговых оболочек, таких, как энцефалиты (воспаления головного мозга), менингиты (воспаления твёрдой мозговой оболочки), арахноидиты (воспаления паутинной оболочки), сифилис мозга, опухоли, травмы и другие заболевания.

1. Количество. Количество извлечённого ликвора зависит от цели пункции и состояния больного. Для обычного исследования берут 8-10 мл, у детей 5-7 мл, у грудных детей 2-3 мл ликвора.

2. Цвет. Для определения цвета ликвор сравнивают с дистиллированной водой на белом фоне.

Нормальный ликвор – бесцветная, прозрачная жидкость, макроскопически трудно отличимая от дистиллированной воды.

Ксантохромия – кофейно-жёлтый цвет ликвора, его дают продукты распада гемоглобина, освобождённые из лизированных эритроцитов.

В зависимости от механизма возникновения ксантохромии различают:

А) застойную – появляется вследствие застоя крови в мозговых сосудах и изменений проницаемости стенок сосудов, эта ксантохромия сопровождается значительным увеличением белков в ликворе.

Б) геморргагическую – развивается при попадании крови в ликворное пространство, в таких случаях должно пройти определённое время до появления ксантохромии, через 2 –12 часов выявляется оранжевая ксантохромия, через 2-4 дня жёлтая.

Ксантохромия может быть также при желтухах (в том числе и у новорождённых) и при субарахноиадальном введении пеницилина.

Эритроцитрахия (кровавый ликвор).

Различают:

[attention type=red]

А) артефактную – эритроциты попадают в ликвор во время пункции – при этом первая порция кровавая, а остальные нет.

[/attention]

Б) истинную, вызываемую кровоизлияниями в ликворную систему при инсульте, опухолях, травмах, при этом все порции ликвора одинаково окрашены.

Зеленовато-жёлтый, серо-зелёный, сероватый цвет ликвора обусловлен большим содержанием в ликворе лейкоцитов. Наблюдается при гнойных менингитах и абсцессах мозга.

3. Прозрачность. В норме ликвор прозрачен (для определения прозрачности ликвор сравнивают с дистиллированной водой). Помутнение ликвора от лёгкой опалесценции до выраженной мутности наблюдается при резком увеличении содержания клеточных элементов (эритроцитов, лейкоцитов, микроорганизмов) и повышенном содержании общего белка.

Мутность определяют на чёрном фоне.

Мутность, обусловленная форменные элементами крови, после центрифугирования исчезает, а связанная с наличием микроорганизмов – остаётся.

Степень мутности выражается в 4-х крестной системе:

– лёгкая опалесценция +

– лёгкое помутнение ++

– мутность +++

– хлопья мути ++++

4. Относительная плотность. Измеряется пикнометром – ареометром малого размера.

Для люмбального ликвора норма – 1,005 – 1,009

Для субокципитального – 1,003 – 1,007

Для вентрикулярного 1,002 – 1,004

Повышается относительная плотность при менингитах, уремии, сахарном диабете, черепно-мозговых травмах.

5. Фибриновая сетка. Для обнаружения фибринозной плёнки ликвор оставляют в пробирке до образования «мешочка».

При воспалении мозговых оболочек вследствие значительного увеличения количества грубодисперсных белков (глобулинов и фибриногена) на поверхности ликвора, если его отстоять, образуется нежная паутинообразная фибриновая сеточка. При большом содержании фибриногена образуется плёнка в виде желеобразного сгустка или ликвор свёртывается.

Фибриновая сетка является важным диагностическим признаком. Наблюдается у больных с гнойным менингитом, туберкулёзным менингитом, опухолями ЦНС, мозговой геморрагией, компрессией и др.

6. Запах. Ликвор в норме не имеет запаха. Запах появляется при некоторых патоогических состояниях:

– При уремической коме – ликвор приобретает запах аммиака.

– При диабетической коме – запах ацетона.

[attention type=green]

7. рН ликвора. В норме среда слабощелочная – рН = 7,35-7,4.

[/attention]

При патологических состояниях существенно не изменяется, определяется с помощью универсальных индикаторных бумажек.

Микроскопическое исследование ликвора

Определение общего количества клеток ликвора (цитоза)

Определение цитоза следует производить как можно скорее после пункции (в течение 30 минут), так как клетки ликвора очень быстро разрушаются.

В норме ликвор беден клеточными элементами. В 1 мл можно обнаружить 0-3-5 лимфоцитов, поэтому их подсчитывают в счётных камерах большей ёмкости, чем для подсчёта клеток крови (в камере Фукса-Розенталя).

Определение цитоза (клеточного состава)

Принцип: при помощи микроскопа в счётной камере Фукса-Розенталя подсчитывают число лейкоцитов в ликворе после разрушения эритроцитов.

Реактивы: реактив Самсона (30 мл ледяной уксусной кислоты, 2 мл карболовой кислоты, 2 мл спиртового раствора фуксина, доливают дистиллированной водой до 100 мл).

Ход определения:

1. Размешать ликвор в пробирке.

2. В меланжер до метки 1 набирают реактив Самсона.

3. До метки 11 набирают ликвор.

Раствор уксусной кислоты гемолизирует возможную примесь эритроцитов, фуксин подкрашивает лейкоциты (ядра клеток окрашиваются в красновато-фиолетовый цвет), карболовая кислота консервирует их.

4. Перемешивают ликвор с реактивом, прокатывая меланжер между ладонями, и оставляют на 15-30 минут для прокрашивания.

5. Первую каплю из меланжера выпускают в фильтровальную бумажку, перемешивают камеру Фукса-Розенталя, которая состоит из 16 больших квадратов, каждый из которых разграфлён на 16 маленьких – всего 256 квадратиков.

6. Считают лейкоциты во всех 256 квадратиков и полученное число делят на 3,2 (объём камеры). Результат соответствует количеству лейкоцитов в 1 мкл ликвора.

Норма цитоза:

Люмбальный ликвор – 7-10 в камере

Цистернальный ликвор – 0-2 в камере

Желудочковый ликвор – 1-3 в камере

Клиническое значение:

Повышенный цитоз – плеоцитоз. Наблюдается при воспалительных поражениях оболочек мозга – менингитах, арахноидитах и органических поражениях вещества мозга (опухоль, сифилис, абсцесс), а также при травмах, кровоизлияниях.

У детей цитоз выше, чем у взрослых.

Подсчёт цитограммы (по Возной)

1. Ликвор центрифугируют 7-10 минут, после надосадочную жидкость сливают.

2. Осадок выливают на предметное стекло, слегка покачивая его для равномерного распределения жидкости на поверхности стекла.

3. Мазок высушивают при комнатной температуре в течение суток.

4. Фиксируют 5 минут в метиловом спирте или 15 минут в этиловом.

5. Красят раствором азур-эозина, разведённого в 5 раз в течение 1 часа.

6. Микроскопируют с иммерсионным маслом.

В норме в ликворе встречаются только лимфоциты.

При патологических состояниях встречаются все виды лейкоцитов, арахноэндотелиальные макрофаги, опухолевые клетки, плазматические клетки, полибласты. Макрофаги появляются после кровоизлияния в ЦНС, при распаде опухоли.

Химическое исследование ликвора

Определение белка в ликворе

Белки – важная составная часть ликвора. Их количественное и качественное отклонение от нормы указывает на органическое поражение ЦНС.

Глобулиновые реакции

Проба Панди.

Унифицированный метод определения глобулинов карболовой кислотой.

Принцип: осаждение глобулинов, появление преципитата (мути), при добавлении к насыщенному раствору карболовой кислоты жидкости, содержащей белок.

Реактивы: насыщенный раствор карболовой кислоты (100 г карболовой кислоты растворяют в 1 л воды, встряхивают и оставляют на стуки в термостате при температуре 370С, затем раствор выдерживают 5-6 суток при комнатной температуре). Для постановки реакции используют надосадочную жидкость.

После пребывания при комнатной температуре в течение 7 дней надосадочную жидкость сливают и используют.

Ход определения:

На часовое стекло, помещённое на чёрную бумагу, наливают 1 мл реактива и по краю наслаивают 1-2 капли ликвора.

Оценка полученных результатов:

Оценка производится по 4-х крёстной системе:

При положительном результате в месте соприкосновения реактива с ликвором образуется молочно-белое облачко, переходящее в муть от лёгкой опалесценции до хлопьев.

[attention type=yellow]

Образование хлопьев (значительное помутнение) ++++, умеренное +++, заметная опалесценция ++, лёгкая опалесценция +, отсутствие помутнения (-).

[/attention]

Проба Нонне-Апельта

Унифицированный метод определения глобулинов

Принцип: соли в определённой концентрации избирательно осаждают глобулины.

Реактивы: насыщенный раствор сульфата аммония.

Ход определения:Продолжение »

Источник: http://bioximia.narod.ru/index/0-348

Состав ликвора при менингитах: расшифровка результата анализа, показатели, цитоз

Подсчет цитоза в ликворе

Нейрохирургам, неврологам и инфекционистам зачастую приходится проводить ломбальную пункцию, то есть сбор спинномозговой жидкости (СМЖ) у пациента. Процедура является очень действенным способом диагностики различных болезней центральной нервной системы (ЦНС).

В клиниках определяют ликворные составляющие, проводят микроскопию и берут СМЖ на микроорганизмы.

Существуют дополнительные меры исследования, например, измерение давления СМЖ, латексная агглютинация, проверка цвета супернатанта. Доскональное понимание каждого из анализов позволяет специалистам применять их в качестве наиболее действенных методов диагностики заболеваний.

Зачем проводить анализ цереброспинальной жидкости

Ликвор (СМЖ, цереброспинальная жидкость) является природной субстанцией, требуемой для нормальной работы ЦНС. Ее анализ наиболее важен среди всех разновидностей лабораторных изучений.

Анализ проводится в несколько этапов:

  1. Подготовительный – включает в себя подготовку пациента, взятие и отправка анализа в лабораторию.
  2. Аналитический – это и есть процедура изучения жидкости.
  3. Постаналитический – является расшифровкой полученных данных.

Только опытные специалисты способны грамотно выполнить все вышеперечисленные действия, от этого зависит качество полученного анализа.

Цереброспинальная жидкость вырабатывается в специальных сплетениях из сосудов, находящихся в головном мозге. У взрослых людей она циркулирует в субархноидальном пространстве и в желудочках мозга, от 120 до 150 мл жидкости, среднее значение в поясничном канале – 60 мг.

Процесс ее образования бесконечен, скорость производства равна от 0.3 до 0.8 мл в минуту, данный показатель напрямую зависит от внутричерепного давления. В течение суток у обычного человека вырабатывается от 400 до 1000 мл жидкости.

Только на показаниях поясничной пункции можно поставить диагноз, а именно:

  • чрезмерное содержание белка в составе СМЖ;
  • пониженный уровнь глюкозы;
  • определение общей численности белых кровяных тел.

При получении этих показателей и повышенном уровне лейкоцитов в крови ставится диагноз «серозный менингит», если происходит увеличение количества нейтрофильных лейкоцитов, то диагноз меняется на «гнойный менингит». Эти данные очень важны, поскольку лечение болезни в целом зависит от них.

Что представляет собой анализ

Жидкость получают методом взятия пункции из спинного мозга, еще ее называют – ломбальной, по определенной методике, а именно: введение очень тонкой иглы в пространство, где циркулирует СМЖ и ее взятие.

Первые капли жидкости удаляют (считается «путевой» кровью), но после этого собирают по меньшей мере 2 пробирки. В обычную (химическую) собирают для общего и химического исследования, вторая является стерильной – для обследования на наличие бактерий.

При направлении пациента на анализ СМЖ врач обязан указать не только ФИО больного, но и его клинический диагноз и цель проведения обследования.

Поставляемые в лабораторию анализы должны быть полностью защищены от перегрева либо охлаждения, а некоторые образцы прогревают на специальных водяных банях, от 2 до 4 минут.

Этапы исследования

Данную жидкость исследуют сразу же после ее сбора. Исследование в лаборатории делится на 4 важных этапа.

Макроскопическое исследование

Процесс имеет несколько важных показателей, которые необходимы для определения точного диагноза.

Цвет

В обычном состоянии данная жидкость абсолютно бесцветна, от воды ее не отличить. При патологиях ЦНС возможны некоторые изменения цвета ликвора. Чтобы точно определить цвет, субстанцию детально сравнивают с очищенной водой.

Немного красный оттенок может означать, что в жидкость попали примеси неизмененной крови – эритроцитархия. Или же это случайное попадание пару капель крови во время взятия анализа.

Прозрачность

У здорового человека СМЖ прозрачная и внешне не имеет отличий с водой. Мутная субстанция может значить, что в организме протекают патологические процессы.

В случае когда после процесса центрифугирования жидкость в пробирке становится прозрачной – это означает, что мутная консистенция обусловлена некоторыми элементами, входящими в состав. Если осталась мутной – микроорганизмов.

Небольшая опалесценция жидкости может быть при повышенном содержании некоторый дисперсных белков, таких как фибриноген.

Фибринозная пленка

В здоровом состоянии в ней почти нет фибриногена. При его большой концентрации в пробирке образовывается тонкая сетка, мешочек либо сгусток, похожий на желе.

Сворачивается наружный слой белка, в результате получается мешочек с жидкостью. Ликвор, в составе которого много белка, сразу же после выпускания начинает сворачиваться в виде желеобразного сгустка.

В случае если спинномозговая жидкость содержит в своем составе красные кровяные клетки, вышеописанная пленка не образуется.

Микроскопическое исследование

Нахождение общего числа клеток спинномозговой жидкости нужно проводить моментально после взятия анализа, поскольку его клеткам свойственно быстрое разрушение.

При нормальных условиях ликвор не богат на клеточные элементы. В 1 мл можно найти 0-3-6 лимфоцитов, из-за этого их считают в специальных камерах большой емкости – Фукса-Розенталя.

Под увеличением в камере для подсчета вычисляют количество белых кровяных тел в жидкости, после разрушения всех красных кровяных тел. В процессе используют реактив Самсона.

Как определяют:

  1. Первым делом размещают СМЖ в пробирке.
  2. В меланжер до отметки в 1 наполняют реактив Самсона.
  3. Далее до отметки в 11 добавляют ликвор и раствор уксусной кислоты, показывающей примесь эритроцитов, добавляют фуксин, придающий лейкоцитам, точнее, их ядрам, красно-фиолетовый цвет. После, для консервации доливают карболовую кислоту.
  4. Реактив и ликвор смешивают, для этого меланжер необходимо прокатать между ладонями и оставить на полчаса для окрашивания.
  5. Первую каплю сразу отправляют в фильтровальную бумагу, смешивают карему Фукса-Розенталя, состоящую из 16 крупных квадратов, каждый из которых делится еще на 16, тем самым образуя 256 квадратов.
  6. Последним шагом является подсчет общего числа лейкоцитов во всех квадратах, полученное число делят на 3.2 – объем камеры. Полученный результат равен числу лейкоцитов в 1 мкл СМЖ.

Нормальные показатели:

  • люмбальный – от 7 до 10 в камере;
  • цистернальный – от 0 до 2;
  • желудочковый – от 1 до 3.

Усиленный цитоз – плеоцитоз, является показателем при активных воспалительных процессах, которые затрагивают оболочки мозга, то есть – менингиты, органические поражения серого вещества (опухоли, абсцессы), арахноидиты, травмы и даже кровоизлияния.

У детей нормальный уровень цитоза выше, чем у взрослых.

Подробные шаги считывания цитограммы:

  1. Жидкость центрифугируют на протяжении 10 минут, послеосадочную сливают.
  2. Осадок убирают на предметное стекло, немного раскачивая его, чтобы он равномерно распределился на поверхности.
  3. После мазок сушат в тепле на протяжении суток.
  4. На 5 минут погружают в метиловый спирт или на 15 в этиловый.
  5. Берут раствор азур-эозина, предварительно разведенный в 5 раз и красят мазок.
  6. Применяют иммерсионное масло для микроскопии.

У здорового человека в СМЖ имеются только лимфоциты.

Если имеются некоторые патологии, можно встретить все разновидности лейкоцитов, макрофаги, полибласты, клетки новообразовавшихся опухолей. Макрофаги образовываются после кровопотери в ЦНС или же после разложения опухоли.

Этот анализ способствует уточнению первичной причины патологии мозговых тканей, помогает оценить причиненный вред, скорректировать последовательность лечения и определиться в прогнозе болезни. Главный недостаток анализа – его проводят только инвазивным вмешательством, то есть, делают пункцию для сбора СМЖ.

[attention type=red]

В нормальном состоянии в составе жидкости находится белок альбумин, при этом очень важно его соотношение в жидкости и процент содержания в плазме.

[/attention]

Такое соотношение называется альбуминовым индексом (в норме его значение не должно превышает 9 единиц). Его увеличение показывает, что поврежден гематоэнцефалический барьер (барьер между тканями мозга и кровью).

Бактериоскопический и бактериологический

Данное изучение жидкости подразумевает ее получение способом прокалывания спинномозгового канала. Под увеличением рассматривают полученную субстанцию или осадок, который получают после центрифугирования.

https://www.youtube.com/watch?v=g0cntWvADjk

Из итогового материала лаборанты получают мазки, которые они изучают после их перекрашивания. Не важно, нашли в СМЖ микроорганизмы или нет, исследование однозначно будет проводиться.

Назначением анализа занимается необходимый в различных ситуациях врач, если имеется подозрение на инфекционную форму менингита, чтобы установить вид раздражителя. Болезнь также может быть вызвана необычной флорой, возможно стрептококками, менингококк – стандартный возбудитель болезни, как и туберкулезная палочка.

За несколько недель до начала развития менингита пациенты очень часто замечают появление кашля, временные повышения температуры и насморк. О развитии болезни может говорить постоянная мигрень распирающего характера, которая не реагирует на лекарственные обезболивающие препараты. При этом температура тела может повышаться до высоких показателей.

При менингококке на поверхности тела образуется сыпь, чаще всего на ногах. Еще больные часто жалуются на негативное восприятие яркого света. Мышцы на шее становятся более твердые, в результате человек не способен дотронуться подбородком к грудной клетке.

Менингит требуют срочной госпитализации с последующим обследованием и срочным лечением в стационарных условиях.

Расшифровка показателей ликвора

Измененный цвет разных интенсивностей может быть вследствие смешивания эритроцитов, которые появляются при недавних травмах мозга или кровопотерях. Визуально заметить присутствие красный кровяных тел можно при их количестве более, чем 600 в мкл.

При разнообразных нарушениях, воспалительных процессах, протекающих в организме, СМЖ может стать ксантохромной, то есть, иметь желтый или же коричневатый цвет из-за продуктов распада гемоглобина. Не следует забывать о ложной ксантохромии – ликвор окрашивается вследствие приема медикаментов.

В медицинской практике встречается и зеленый оттенок, но только в редких случаях гнойного менингита или мозгового абсцесса. В литературе коричневый цвет описывается, как прорыв кисты краниофарингномы в пути ликвора.

[attention type=green]

Помутнение жидкости может означать наличие в ней микроорганизмов или же кровяных клеток. В первом случае помутнение можно убрать методом центрифугирования.

[/attention]

Исследования состава СМЖ является особо важной задачей, включающей в себя большое количество различных манипуляций, тестов и подсчетов, при этом необходимо обращать внимание на множество других показателей.

После проведения процедуры пациенту на сутки назначают постельный режим. В течении следующих дней у него могут появиться жалобы на мигрень. Это связано с перенапряжением оболочек мозга из-за сбора жидкости во время процедуры.

Источник: https://nevralgia.ru/meningit/sostav-likvora/

Лечимся дома
Добавить комментарий

;-) :| :x :twisted: :smile: :shock: :sad: :roll: :razz: :oops: :o :mrgreen: :lol: :idea: :grin: :evil: :cry: :cool: :arrow: :???: :?: :!: